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注意事項：

（1） 樣品應是均勻的。固體樣品應預先研細混勻，液體樣品應振搖或攪拌均勻。

（2） 樣品放入定氮瓶?jì)葧r(shí)，不要沾附頸上。萬(wàn)一沾附可用少量水沖下，以免被檢樣消化不完全，結果偏低。

（3） 消化時(shí)如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷后，慢慢加入30%過(guò)氧化氫（H2O2）2-3ml，促使氧化。

（4） 在整個(gè)消化過(guò)程中，不要用強火。保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無(wú)硫酸存在的情況下，使氮有損失。

（5） 如硫酸缺少，過(guò)多的硫酸鉀會(huì )引起氨的損失，這樣會(huì )形成硫酸氫鉀，而不與氨作用。因此，當硫酸過(guò)多的被消耗或樣品中脂肪含量過(guò)高時(shí)，要增加硫酸的量。

（6） 加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點(diǎn)，硫酸銅為催化劑，硫酸銅在蒸餾時(shí)作堿性反應的指示劑。

（7） 混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。如果沒(méi)有溴甲酚綠，可單獨使用0.1%甲基紅乙醇溶液。

（8） 氨是否完全蒸餾出來(lái)，可用PH試紙試餾出液是否為堿性。

（9） 吸收液也可以用0.01當量的酸代表硼酸，過(guò)剩的酸液用0.01N堿液滴定，計算時(shí)，A為試劑空白消耗堿液數，B為樣品消耗堿液數，N為堿液濃度，其余均相同。

（10） 以硼酸為氨的吸收液，可省去標定堿液的操作，且硼酸的體積要求并不嚴格，亦可免去用移液管，操作比較簡(jiǎn)便。

（11） 向蒸餾瓶中加入濃堿時(shí)，往往出現褐色沉淀物，這是由于分解促進(jìn)堿與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀。有時(shí)銅離子與氨作用，生成深l藍色的結合物[Cu(NH3)4]2+

（12） 這種測算方法本質(zhì)是測出氮的含量，再作蛋白質(zhì)含量的估算。只有在被測物的組成是蛋白質(zhì)時(shí)才能用此方法來(lái)估算蛋白質(zhì)含量。